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Sonntag, 20. Mai 2012

Nissl / Kresyl Violett Färbung

 

Autoren

Dr. Serge Thal

Zusammenfassung

Färbung zur Darstellung von Neuronen.

Materialien

Reagenzien:
  • Aqua dest.
  • 70% Ethanol
  • 96% Ethanol
  • 100% Ethanol
  • Kresylviolett acetat
Geräte:
  • Färbeschalen und Objektträgerschalen
  • Stopp-Uhr

Kresylviolett Färbe-Lösung:
  1. 5 g Kresylviolett in 100 ml Ethanol (100%) geben
  2. 30 min mischen mit Magnetrührer bei 50°C
  3. add 500ml Aqua dest.
  4. dann Lösung filtern (dauert lange, bis zu ca. 4 Stunden!)
  5. In einer dichten Flasche aufbewahren

Durchführung

  1. Gefrierschnitte ca. 1 Stunde trocknen
  2. 2 min    70% Ethanol
  3. 10 min    Kresylviolett Färbe-Lösung
  4. 2x kurz    Aqua dest
  5. 2x kurz    70% Ethanol
  6. 2x kurz    96% Ethanol
  7. 2x kurz    100% Ethanol
  8. 5 min    Xylol/Rothihistol
  9. 2 min    Xylol/Rothihistol
  10. Einbetten

Kritische Schritte

Die Reihenfolge der Alkohol-Lösungen dürfen nicht vertauscht werden. Wenn bei der Einbettung blaue Fecken auf em Objektträger sichtbar sind, so war die Lösung vor dem Xylol/Rotihistol keine 100%ige Ethanol-Lösung sondern enthielt zuviel Wasser.

Fehlersuche

folgt

Danksagung

folgt

Referenzen

  • Laborprotokoll der AG Werner, Klinik für Anästhesiologie, Uniklinik Mainz

Spezielle Protokolle

keine

Diskussion

keine